М 13 содержит в своем составе 1-нитевую ДНК, при клонировании в составе таких фагов учитывается следующее:
В составе ДНК есть некодирующие последовательности, внутрь которых можно проводить встаривание чужеродной ДНК;
Клонировать можно фрагменты ок. 5 тыс. пар оснований;
После заражения клетки они не вызывают их лизиса, а способны секретироваться из клетки, накапливаться в среде и, следовательно, можно получать фаговые лизаты с высоким титром;
После клонирования in vitro фрагмент 2-нитчатой формы водится в клеточный цикл фага завершается и образуются 1-нитчатые ДНК содержащие клонированный 1-нитевой фрагмент.
Использование 1-нитевых фагов:
1. Используются для осуществления процесса секвенирования (определение нуклеотидной последовательности);
2. Используются для направленного мутагенеза;
3. Используются для приготовления радиоактивных зондов.
